Fabio di Giannantonio je nastavio sa tempom iz prvog treninga, gdje je i na slobodnom treningu pokazao da je izuzetno spreman za najveži domet. Francesco Bagnaia se smjestio na drugo mjesto uz zaostatak od 0.091. Pozicija broj tri je pripala Enei Bastianiniju, koji je bio od Bafnaie samo 0.012 sekundi sporiji.

Fabio Di Giannantonio kompletirao je savršen petak na stazi Mugello postavivši najbrže vrijeme i na treningu. Za Pedra Acostu uslijedio je veliki udarac.

Nakon što je Di Giannantonio u petak ujutro postavio najbrže vrijeme na prvom slobodnom treningu za Veliku nagradu Italije, trkaći vikend nastavljen je kasnije tokom dana prvom važnom sesijom – treningom. Za vozače je bilo od velike važnosti da završe među prvih deset jer je to garantovalo direktan plasman u drugu kvalifikacijsku rundu.

Di Giannantonio je i na treningu krenuo snažno. Italijanski vozač VR46 Ducatija postavio je prvo referentno vrijeme, koje su tokom prvog izlaska na stazu nadmašili samo Francesco Bagnaia i Alex Rins. Bagnaia je bio najbrži pri povratku u boks nakon kruga od 1:45.697. Rins je zaostajao svega pet hiljaditinki, dok su Di Giannantonio i Jorge Martín također bili unutar jedne desetinke.

Nekoliko vozača dobilo je novi set guma za drugi izlazak na stazu, što je dovelo do promjena u poretku. Tako je Ai Ogura nakratko preuzeo vrh s vremenom tri stotinke boljim od Bagnaijinog, nakon čega je Marco Bezzecchi značajno podigao ljestvicu krugom od 1:45.024.

Bezzecchi je bio na vrhu kada je trening na polovini sesije morao biti prekinut. Razlog za crvenu zastavu bio je pad Fabija Quartarara. Vozač Yamahe prošao je bez povreda nakon pada u četvrtom zavoju, ali je njegov oštećeni YZR-M1 ostao na idealnoj putanji te su ga redari morali ukloniti sa staze. Prekid je trajao oko pet minuta.

Nedugo nakon nastavka treninga problemi su ponovo pogodili Yamahu. Ovoga puta pao je Pramacov vozač Jack Miller, koji je izgubio prednji kraj motocikla pri ulasku u prvi zavoj i završio u šljunku. Australac je također prošao bez povreda, ali je izgubio dragocjeno vrijeme i jedan od svoja dva motocikla.

Poboljšanja vremena stigla su tek u posljednjih petnaest minuta kada su svi vozači krenuli u kvalifikacijske simulacije na novim gumama. Brad Binder nije imao sreće jer je njegov KTM odmah pogodio tehnički problem. Kako je svoj RC16 parkirao na izlazu iz boksa, izazvao je i drugu crvenu zastavu tokom sesije.

Uslijedio je još jedan kraći prekid, nakon čega su se vozači vratili na stazu nešto više od deset minuta prije kraja. Tada je uslijedio niz poboljšanja vremena, pri čemu su Ducati vozači imali glavnu riječ. Preko Marca Marqueza, Franca Morbidellija i Bagnaije, prvo mjesto na kraju je pripalo Di Giannantoniju koji je zaustavio štopericu na 1:44.808.

To je bilo dovoljno da petak u Mugellu završi kao najbrži vozač. Bagnaia je zaostao 0.091 sekundu, dok je Enea Bastianini postavio impresivno treće vrijeme. Slijedili su Morbidelli, Aldeguer, Marquez i Bezzecchi.

Jorge Martin osigurao je plasman u drugu kvalifikacijsku rundu u posljednjem krugu postavivši osmo vrijeme, dok su Alex Rins i Diogo Moreira također izborili mjesto u borbi za pole position.

Vozači Trackhousea Ai Ogura i Raul Fernandez ostali su bez mjesta među deset najboljih te će u subotu ujutro morati nastupiti u prvoj kvalifikacijskoj rundi. Isto vrijedi za Pedra Acostu i Brada Bindera iz KTM-a, kao i za Quartarara na tvorničkoj Yamahi.

Subotnji program u Mugellu počinje drugim slobodnim treningom u 10:10, nakon čega slijede kvalifikacije od 10:50.